其他名称: PUC18质粒

级别: BR

配比浓度: 1ug/ ul

性状: 粉末.pUC18是适合于双脱氧法DNA测序的载体, 通常运用于重组dna的分子克隆中, 首先我们制备大肠杆菌的感受态细胞 (能接受外来重组的dna) ,这种感受态菌株必须不同外来DNA分子发生遗传重组, 通常是rec基因缺陷型的突变体, 同时它们必须是限制系统缺陷或限制与修饰系统均缺陷的菌株, 即具有具有这三种缺陷 (rk mk rec ) ,同时对氨苄青霉素敏感 (ap) .puc18载体自身带有抗氨苄青霉素基因, 而外源片段不具有, 这样只有带有puc18的转化子的菌株才能在氨苄青霉素平板上存活, 而外源片段自身环化的不能存活, 这称为抗性筛选. pUC18 上带有β-半乳糖苷酶基因 (lacZ) 的调控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 个氨基酸的编码序列, 在这个编码区中插有一个多克隆位点, 且不影响正常功能, DH5α感受态菌株带有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的编码信息, 当puc18载体在正常情况下同感受态菌株融合后, 互补表达具有酶活性的蛋白质, 称为α-互补现象, 当有外源片段插入多克隆位点后, 互补现象消失, 其形成的菌株颜色具有很大的差异, 很容易鉴别, 这种筛选方法称为α-互补现象筛选. 由上可见, puc18载体除了能重组导入外源片段外, 在筛选表达过程中还具有重要的作用

用途: 生化研究. 克隆外源基因. 利用lac promoter进行基因表达. 使用M13 primers进行DNA测序.

保存: -20℃