英文名称: T4 DNA Polymerase
CAS号: 9012-90-2
分子量: 104kDa, 单体

级别: BR
来源: 含有T4噬菌体克隆基因43的大肠杆菌
浓度: 5~10u/ ul
活性定义: 是指在37℃, 30分钟内将10nmol脱氧核糖核苷酸掺入多聚核苷酸片段 (吸附在DE-81上) 所需的酶量
酶活性分析混合物: 67mM Tris-HCL (PH8.8) , 1mM DTT, 6.7mM MgCL2, 16.7mM (NH4) 2SO4, 0.2mg/ ml BSA, 0.033mM各种dNTP, dGTP, 0.4MBq/ ML (3H) .-dTTP和0.2mM热变性和核酸酶处理的牛胸腺DNA
保存缓冲液组分: 20mM 磷酸钾 (PH7.5) , 200mM KC1, 20mM DTT和50% (v/ v) 甘油
5*反应缓冲液: 335mM Tris-HCL (PH8.825℃) , 33mM MgCL2, 5mM DTT, 84mM (NH4) 2SO4
抑制剂: 金属螯合剂, 核苷酸类似物2 (p-n-butylanilino) -dATP, N2- (p-n-burylanilino) -dGTP, SH-封闭混合物
失活: 75℃加热10分钟
质量控制: 测试表明无内切脱氧核糖核酸酶污染
性状: 悬浮液. 重组酶, 在模板及引物存在的条件下, T4 DNA聚合酶催化沿5'→3'方向DNA的合成. 本酶还具有3'→5'外切核酸酶的活性, 该活性比DNA聚合酶I强. T4 DNA聚合酶不像大肠杆菌DNA 聚合酶 I, 不具有5'→3 外切核酸酶的活性.
用途: 生化研究. 3'突出末端平滑化; 5'突出末端补平; 单链删除后亚克隆; 基因定位突变中的第二条链的合成; 通过置换合成法 (replacement synthesis) 对DNA探针进行标记.
保存: -20℃