英文名称: TDT; Terminal Transferase; Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
其他名称: 末端脱氧核苷酸转移酶; 胸腺五肽

CAS号: 9027-67-2
分子量: 60000

级别: BR
来源: 大肠杆菌细胞, 含有编码牛胸腺末端脱氧核苷转移酶的基因
浓度: 20u/ ul
活性定义: 是指在37℃, 60分钟内将1nmol脱氧核糖核酸掺入多聚核苷酸片段 (吸附在DE-81上) 所需的酶量
酶活性分析混合物: 66mM二甲胂酸钾 (PH7.2) ,1mM CoCL2, 0.01% (v/ v) Triton X-100, 10uM oligo (dT) 10, 1mM dTTP和0.4MBq/ ml[3h]-dTTP
保存液组分: 100mM 醋酸钾 (PH6.8) ,2mM β-巯基乙醇, 0.01% (v/ v) Triton X-100和50% (v/ v) 甘油
5*反应缓冲液: 1M 二甲胂酸钾, 125mM Tris, 0.05% (v/ v) Triton X-1005mM CoCL2 (PH7.225℃)
抑制剂: 金属螯合剂, 铵, 氯化物, 碘化物和磷酸盐离子
失活: 加入EDTA, 70℃加热10分钟
质量保证: 测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶, 核糖核酸酶, 磷酸酶污染
注意: 由于含有CoCL2, TdT反应缓冲液不能与下游应用兼容, 需采用柱离心法或苯酚/ 氯仿抽提及乙醇沉淀方法纯化反应混合物, 除去CoCL2
性状: 悬浮液, 重组酶. 末端转移酶 (Terminal transferase, TdT) 是一种无需模板的DNA聚合酶, 催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'羟基端. 带有突出, 凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TdT的底物. 一般操作是: 先在载体上打开一单个位点, 把它与末端转移酶和某一dNTP (如dATP) 一起保温以使添尾, 另一待插入的外源DNA片段则用互补的用同法添dNTP (dTTP) 用同法添尾. 接着使上述两种都接上互补单链尾的DNA片段彼此退火, 使形成一杂合载体来转化受体菌. 杂合载体中的裂隙或切口可被受全菌所修复.
用途: 生化研究. 催化DNA的3'末端添加同聚物; DNA的3'末端标记
保存: -20°C